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小鼠VEGF ELISA試劑盒說明書

2016-02-19 瀏覽次數:2050

一. 小鼠VEGF ELISA試劑盒背景介紹:

    血管內皮生長因子 (VEGF) 是生長因子的亞家族,具體來說,屬于胱氨酸結生長因子中的血小板衍生生長因子 (PDGF) 家族。它們是重要的信號轉導蛋白,參與血管發生 (胚胎循環系統從形成) 和血管生成 (從已存在的脈管系統生長形成血管)。VEGF可刺激血管發生和血管生成。當血液循環不足時,可參與回復組織供氧系統。VEGFzui主要的作用是血管生成。在胚胎形成期,VEGF調控內皮細胞的增殖、遷移和存活,從而調控血管密度和大小,但無法決定血管的類型。在支氣管哮喘和糖尿病患者的血清中含有高濃度 VEGF。當 VEGF過表達時會引起疾病。供血不足時,實體腫瘤的大小受限;而表達 VEGF的腫瘤則會不斷生長并發生轉移。VEGF過表達會導致眼睛視網膜和身體其他部分的血管性疾病。貝伐珠單抗和雷珠單抗可抑制 VEGF,并控制或減緩疾病進程。

 

二. 小鼠VEGF ELISA試劑盒檢驗原理:

    本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗小鼠 VEGF單克隆抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經過孵育,樣本中存在的 VEGF與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中 VEGF的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。

 

三.小鼠VEGF ELISA試劑盒標本收集:

1.細胞培養上清
300 g離心 10分鐘去除沉淀物,即刻檢測, 或者分裝,-20℃以下貯存。

 

2.血清標本

分離管分離血清。在 1000 g離心之前,使血樣凝集 30分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測,或
者分裝,-20℃以下貯存。

 

3.血漿樣本
EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝收集血漿樣本。1000 g離心 3 0分鐘收集樣本。即刻檢測,或者
分裝,-20℃以下貯存。

本試劑盒可能適用于其它生物學樣本。細胞培養上清、血清和血漿已經過驗證。
注意:檢測前,樣本中可見的沉淀必須去除。不要使用嚴重溶血或高血脂的樣本。
樣本應分裝并貯存于-20℃,以避免小鼠 VEGF活性的丟失。如果在 24小時內檢測,樣本可
以存放在 2 - 8℃。
避免樣本的反復凍融。在檢測前,冷凍樣本應該緩慢地恢復至室溫,輕柔地混勻。

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