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技術文章 / article
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ELISA試劑盒真偽辨別?

2018-09-04 瀏覽次數:3620

近年來,隨著國內生物醫學的發展越來越大,一些不良商家開始賣一些假冒試劑盒,給科研工作者帶來了很多的麻煩,浪費了標本,還影響了實驗進程。小編特整理了一些鑒別假冒偽劣ELISA試劑盒的方法供廣大科研工作者和用戶參考,希望對廣大科研工作者有所幫助。

 

購買前

【方法一】向廠家索要或下載說明書,查找ELISA的性能指標:準確度(加標回收率、稀釋線性)、精密度(板內差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準。一般來說,除了校準不一定每份說明書都有外,其余的指標一般都需要羅列(部分樣本需要高倍稀釋的,可能沒有準確度這個指標)。如果無法提供這些性能指標,則說明該試劑盒可能是假貨,或者試劑盒開發過程不夠科學嚴謹,有可能無法檢測出真實的樣本值。

 

【方法二】對于夸大ELISA涵蓋的指標的范圍,尤其是不常見的種屬,可先去ELISA試劑盒供應商(如eBioscienceR&D)上搜索,如果搜索不到該種屬的ELISA試劑盒,則有可能是假貨,需要小心謹慎。

 

【方法三】將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”等關鍵詞在網上搜索,有的論壇如丁香園等會有打假曝光臺。


購買后

【方法一】檢查說明書、包裝盒的質量,通常假冒偽劣產品為了降低成本,印刷的質量會比較差。其次仔細閱讀說明書,如上所示查找ELISA的性能指標。

 

【方法二】

I.如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:

(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。

(2) 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。

(3) 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。

(4) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物。

(5) 實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(6) 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。

 

II. 利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:

(1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液

(2) 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體

(3) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物

(4) 實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(5) 如果標準曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

 

 

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